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绿色荧光蛋白GFP作为植物中的重要报告基因

发布时间:2024-03-01 13:17:09 人气:151 来源:析浦(上海)科学仪器

绿色荧光蛋白GFP在植物中的应用

绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)可作为多种活植物细胞和转基因植物中的报告基因。GFP因其多功能且灵敏的特性,正越来越多地应用于植物生物学中。应用于细胞上时,GFP被用作体内报告基因来评估瞬时和稳定转化的频率。GFP也被证明是监测蛋白质运输和亚细胞定位的理想工具。具有更强大折叠特性的更明亮的GFP突变体的开发使得整个叶子和植物中的GFP能够更好地宏观可视化。一个有趣的例子是使用GFP来监测病毒在整个植物内部和植物之间的移动。GFP也正在成为监测转基因运动和田间转基因植物的强大工具。GFP是一个真正可用于整个植物的体内报告系统。随着更多GFP基因变体的出现,GFP的用途将进一步增加。

有研究表明,重新设计的GFP基因序列与高表达的人类蛋白质的密码子相比,在玉米叶细胞中的GFP表达量比原始水母GFP序列高20倍。当与生色团突变相结合时,新的GFP序列在490nm蓝光激发下可产生100倍以上的明亮荧光信号,并且生色团形成速度更快。不需要外源底物、辅因子或其他基因产物。GFP在植物细胞中非常稳定,几乎没有光漂白现象。基于GFP的荧光激活细胞分选后即可获得活细胞。

这种修饰的GFP在各种瞬时表达系统中具有广泛的用途,并且可以轻松检测弱启动子活性,可视化靶向细胞核和各种质体的蛋白质,分析活体单细胞和体内的信号转导途径,以及高等植物转基因活细胞和组织中的许多其他应用。GFP作为新的报告基因可用于监测高等植物中的基因表达、信号转导、共转染、转化、蛋白质运输和定位、蛋白质-蛋白质相互作用、细胞分离和纯化以及细胞谱系。

绿色荧光蛋白GFP应用图片

检测绿色荧光蛋白GFP的荧光表达

绿色荧光蛋白GFP在特定波长的光线(通常是蓝光440-460nm或紫外光365nm)激发下,会发出明亮荧光。

析浦科学仪器专业生产荧光蛋白激发光源荧光手电筒GFPfinder-2101, 荧光蛋白观察箱GFPfinder-2106, 三色荧光蛋白激发光源GFPfinder-2103。多种激发光波长可选,可激发各种荧光蛋白或荧光发色团。无需显微镜,直接照射GFP样本,就可以观察荧光表达,高效灵敏!

下图:GFPfinder-2106荧光蛋白激发光源,搭配便携式观察暗箱,可轻松观察种子、愈伤组织、叶片等植物样本的GFP荧光!

荧光蛋白观察箱GFPfinder-2106

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