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zsgreen可以用gfp的光激发吗?

发布时间:2023-08-03 21:17:09 人气:1131 来源:析浦科学仪器

ZsGreen荧光蛋白是1999年发表的一种碱性(本构荧光)绿色荧光蛋白,来源于Zoanthus sp.。ZsGreen荧光蛋白激发波长(EX)是496nm,发射波(EM)是506nm。ZsGreen荧光蛋白是用蓝光激发,发出绿色荧光。

ZsGreen1且在505纳米处具有发射峰的珊瑚礁珊瑚蛋白已被引入,以替代增强型绿色荧光蛋白。当在哺乳动物细胞中表达时,ZsGreen1相对于EGFP明亮,但在产生融合突变体方面的作用有限,并且与其他珊瑚礁蛋白类似,具有形成四聚体的趋势。

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ZsGreen is a basic (constitutively fluorescent) green fluorescent protein published in 1999, derived from Zoanthus sp..

ZsGreen荧光蛋白的激发光波长和发射光波长

ZsGreen荧光蛋白的激发光波长和发射光波长的光谱图

zsgreen和gfp的区别

由上图可以看出,ZsGreen荧光蛋白和GFP、eGFP的激发光波长是一样的,所以,zsgreen可以用gfp的光激发,ZsGreen荧光蛋白和GFP、eGFP的区别是ZsGreen荧光更亮。

GFP在烟草叶片上的表达

上图:GFP在烟草叶片上的表达


为什么紫外线灯(UV)能激发GFP的荧光?

野生型绿色荧光蛋白wtGFP

野生型GFP(wild type GFP, wtGFP)从一开始就引起了人们极大的兴趣,而且被用作新型的简单报告基因及体内标记,但GFP在异源生物体中的表达并非那么简单。例如,研究人员很早就发现需要在较高的温度下孵育才能在细胞或生物体中表达GFP,并且wtGFP在37℃的热稳定性差。这些都阻碍了它在转基因中的应用。这些难题促使人们进一步筛选分离wtGFP的变体。现在,人们已经找到了荧光强度更强且更耐热的变体。这些变体多数为经突变的脱辅基蛋白,它们可防止高温导致的错误折叠。近年来出现的新型wtGFP基因突变体的激发和发射谱发生了改变,热稳定性和荧光强度得到了提高,GFP报告基因在小鼠中的应用就是以这些变体作为基础的。


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上图为:wtGFP的激发光发射光光谱图

增强型绿色荧光蛋白(EGFP)

现在,应用最为广泛的是红移变体增强型GFP(EGFP)。诸如EGFP这些红移变体的更大激发峰发生红向移动,大约为490nm,这一波长也恰好是多数分光设备、流式细胞仪及共聚焦显微镜的常用波长。EGFP有两个氨基酸突变,当被蓝光激发时,它发出的荧光要比wtGFP亮30-40倍。wtGFP和包括EGFP在内的多数变体半衰期长,所以不适合追踪表达的减少或损耗。

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上图为:eGFP的激发光发射光光谱图

由上图可以看出来,wtGFP、avGFP的主要激发波长在紫外线波段,所以,用紫外线灯能够观察到GFP的荧光,但如果是增强型的绿色荧光蛋白,如egfp、mGFP、ZsGreen,用紫外线是无法激发出荧光的,必须用析浦科学的488nm的蓝光手电筒才可以激发。所以,在观察绿色荧光蛋白之前,必须先搞清楚是哪种荧光蛋白,再选择具体合适的荧光手电筒

如果要观察绿色荧光蛋白(GFP、eGFP、avGFP、ZsGreen)的表达,析浦科学仪器公司生产的便携式荧光蛋白激发光源可以选择GFPfinder-2101RB和GFPfinder-2102RG系列双波长荧光蛋白激发光源。绿色荧光蛋白采用析浦科学仪器公司的蓝光手电筒激发,佩戴LUV-30A黄色观察眼镜观察,如希望提供更多详细信息,可直接联系132-6228-9628.

荧光手电筒

上图为GFPfinder-2101荧光手电筒

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标签:荧光蛋白,
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