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EMSA实验中,将DNA交联到膜上的3种方法

发布时间:2023-10-26 10:14:48 人气:475 来源:析浦(上海)科学仪器

凝胶迁移实验(Electrophoretic Mobility Shift Assay, EMSA)的原理是,不同大小、分子量和电荷的蛋白质在非变性凝胶基质中将具有不同的电泳迁移率。对于DNA-蛋白质复合物,DNA结合蛋白的存在将导致DNA以特有的方式迁移,通常比游离DNA更慢,从而导致DNA迁移率发生变化。

EMSA实验通常包括几个步骤,包括凝胶制备、结合反应、电泳结合反应、转移结合反应到尼龙膜中、将转移的DNA交联到膜上以及观测。

EMSA实验中,将DNA交联到膜上有三种方法:

  1. 析浦核酸紫外交联仪XEPU-1215:使用配备15瓦254nm紫外灯管的XEPU-1215紫外交联仪,以120mJ/cm2交联,照射45-60秒。析浦紫外交联仪出厂是有预设的120mJ/cm2能量设置,可在预设模式下直接使用此默认设置。

  2. 析浦手持式紫外线灯XEPU-1328S:使用配备254nm紫外灯管的析浦手持式紫外线灯XEPU-1328S,在距离膜约0.5cm处照射5-10分钟。析浦手持式紫外灯可选配支架使用,解放双手,适合长时间照射。

  3. 析浦紫外透射台XEPU-1126S:在配备254nm紫外灯管的透射仪XEPU-1126S上,将膜面朝下放置,照射10-15分钟。析浦紫外透射台带有无极调光旋钮,可根据需要自由调节光强度。

下图:析浦核酸紫外交联仪XEPU-1215

析浦核酸紫外交联仪XEPU-1215

下图:析浦手持式紫外灯XEPU-1328S

析浦手持式紫外灯XEPU-1328S

下图:析浦紫外透射台XEPU-1126S

析浦紫外透射台XEPU-1126S

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标签:紫外交联仪, 紫外灯, 紫外透射台,
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